Evaluación del potencial cardioprotector de fitomoléculas en modelos in vitro e in vivo de Cardiomiopatía Inducida por Estrés
La
cardiomiopatía inducida por estrés (CIE), también conocida como síndrome de
Takotsubo o "síndrome del corazón roto", es causada por la liberación
masiva de catecolaminas bajo intenso estrés emocional o físico. Sus síntomas son
similares a los del infarto agudo de miocardio, aunque se presenta en ausencia
de obstrucción de las arterias coronarias. Inicialmente considerada benigna y
reversible, la CIE es actualmente reconocida por su potencial recurrencia y por
las complicaciones que conlleva, incluida la muerte. Hasta el momento, las
bases moleculares que desencadenan esta enfermedad no se conocen del todo, por
lo que actualmente existe una carencia de marcadores diagnósticos y de estrategias
terapéuticas específicas para su tratamiento.
Este
proyecto tiene el doble objetivo de (1) estudiar la remodelación
transcripcional, traslacional y postraduccional de proteínas cardíacas clave; y
(2) correlacionar estos cambios con las alteraciones funcionales y el daño,
tales como la disfunción del Ca²⁺ y contráctil, la desregulación de canales iónicos y la arritmogénesis, las alteraciones
metabólicas y el estrés oxidativo/nitrosativo, la
inflamación, la supervivencia celular y la
fibrosis, así como identificar marcadores
moleculares sistémicos que puedan ser utilizados para el diagnóstico.
Metodología:
1. Modelos
de CIE: se establecerá en ratas y en células cardíacas H9c2 tratadas con
una sobredosis de isoproterenol, caracterizados mediante técnicas de última
generación como PCR digital, citometría de flujo, Western Blot, microscopía
confocal, patch clamp y ensayos bioquímicos.
2. Evaluación
del efecto cardioprotector: Adicionalmente, se investigará el potencial
cardioprotector de fitomoléculas ricas en antioxidantes y polifenoles
antiinflamatorios, para determinar si pueden proteger o mitigar la remodelación
molecular patológica en los modelos de CIE. Para ello se contempla medir la
producción de especies reactivas de oxígeno/nitrógeno y el grado de daño
causado por estrés oxidativo/nitrosativo en tejido cardíaco, monitorear moléculas
de inflamación y alteraciones en la expresión de proteínas de la defensa
celular antioxidante.
Impacto:
Este proyecto
pretende lograr un mejor entendimiento de los mecanismos moleculares de la CIE,
que contribuya a identificar marcadores sistémicos de valor diagnóstico, y a
desarrollar nuevas estrategias terapéuticas para el tratamiento de los
pacientes de CIE.
Las
actividades que forman parte de esta oportunidad de investigación son:
- Establecimiento del modelo in vitro de CIE, en células H9c2:
- Caracterización de los modelos de CIE mediante el monitoreo de cambios anormales propios de esta patología:
- Confirmación de cambios transcripcionales por PCR digital.
- Monitoreo de potenciales cambios post-transduccionales por Western Blot.
- Caracterización de alteraciones varias mediante el análisis de marcadores bioquímicos y
- Fenotipificación del daño presente en el modelo de CIE mediante el estudio de marcadores bioquímicos, marcadores de estrés oxidante, daño e inflamación, entre otros.
- Análisis del efecto cardioprotector:
- Medición de la producción de especies reactivas de oxígeno/nitrógeno mediante métodos colorimétricos y fluorométricos.
- Monitoreo del grado de daño causado por estrés oxidativo/nitrosativo mediante técnicas como TUNEL, citometría de flujo, western blot, PCR digital, etc.
- Análisis de cambios en la producción y secreción de moléculas de inflamación mediante ELISA y de alteraciones en la expresión de proteínas de la defensa celular antioxidante por PCR digital.
- Análisis y procesamiento de resultados:
- Procesamiento, análisis e interpretación de los resultados obtenidos en las etapas experimentales, bajo la supervisión de los investigadores responsables del proyecto.
- Registro y presentación de la información:
- Registro de las actividades y los protocolos desarrollados en el laboratorio, incluyendo resultados, observaciones, retroalimentación, etc.
- Escritura y presentación de un informe final detallado, en formato texto y presentación.
- Potencial aportación a la elaboración de un manuscrito para su posterior publicación o para una presentación en congresos especializados.
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Rocio.Rojo@tec.mx
Cardiomiopatía Inducida por Estrés
Síndrome de Takotsubo
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